啮齿类动物手术指导原则

1 背景

本文详述了啮齿类动物手术过程中需要遵守的操作原则，在IACUC方案中列出了相关替代流程的操作可除外。实验研究者有责任确保动物得到充足的麻醉/术后护理，提供护理的人员必须熟悉方案流程，同时具备进行如下所示评估的技能和能力，并且必须能够在发生术后并发症时提供充足的兽医支持。值得注意的是，以下的这些原则描述的均是最低标准。

2 麻醉和镇痛

啮齿类动物麻醉指南和要求需在啮齿类动物麻醉护理的SOP中概述。除非有充足的理由，所有手术的镇痛给药应在术前或术中开始，并持续至术后至少24小时。需要局部麻醉时，应在组织切开前注射局部麻醉剂，利多卡因在注射2-5min内起效，布比卡因在注射15min内起效。

3 手术区域准备

啮齿类动物手术操作区域必须位于设施内不同时开展其他活动的区域。使用前该区域必须清洁并保持整洁，所有物品、设备表面均应清洁和消毒。

4 器械和创巾准备

• 手术前必须采用可接受的方法对手术器械进行灭菌，方法包括高压灭菌、环氧乙烷灭菌和特定的冷灭菌技术，单独使用酒精不是可接受的灭菌方法。

• 灭菌器的功能以及器械包的无菌性确认必须按照高压灭菌器监测和无菌包装储存标准执行。

• 手术过程中，可使用热珠灭菌器对器械进行重复灭菌：使用无菌纱布擦拭器械上的所有有机材料后，将其放入微珠中30-45秒，此操作最多用于4只动物的手术器械灭菌，后续就必须拆用新的手术器械包。

• 所有的植入物（微型泵、导管、缝合材料）必须无菌。

• 应使用无菌铺巾覆盖未剃毛的区域，铺巾可接受的材料包括棉布、透明粘性铺巾和大纱布方块。另外还需建立手术器械的无菌区域，以防污染。

5 手术人员准备

所有手术人员必须戴口罩和手术帽，口罩将口鼻完全罩住，手术帽需将所有的头发包裹。手部刷洗完毕后，穿无菌手术服，戴无菌手套（不能接触手套的外表面）。整个过程保持器械和手套的无菌。

6 动物准备

• 手术因麻醉时间、体腔暴露面积等原因，易出现术中体温变化，需额外提供温水毯等保温措施。

• 双眼涂抹眼膏，防止角膜干燥。

• 必须清除切口周围区域的所有毛发，可以使用剃毛刀或脱毛膏（使用不当可导致皮肤的化学烧伤），脱毛的区域需要足够大，以防器械或缝线接触到未备好的皮肤。

• 对切口部位进行手术部位准备：（注：仅用酒精不能满足切口的消毒需求），从手术切口部位开始向外旋转，以环形方式，使用碘伏或氯己定纱布进行消毒，每次使用后，丢弃纱布，重复至少三次。注意避免使用酒精等抗菌剂过度湿润手术区域，可能会加剧体温的丢失，造成低体温。

7 切口闭合

• 必须至少分两层闭合体腔（体壁和皮肤）。

• 为防止动物撕咬伤口裂开，除非方案另有说明，否则必须采用简单间断缝合方式闭合伤口。

• 也可以使用伤口夹、组织胶闭合皮肤，注意涂胶过多是导致动物自残和伤口裂开的常见原因。外部缝线必须是单股材料，以防止毛细作用及可能的伤口感染。

8 术后护理

• 动物苏醒后，将动物送回笼中饲养，除非方案另有说明。作为支持性治疗计划的一部分，可提前24-48小时将食物置于笼盒中。

• 研究人员应第二天一早检查动物状态，之后至少每天检查一次，持续7-10天，直至拆除缝线或伤口夹，确保动物可正常进食、饮水、活动和走动。

• 检查手术切口部位是否有透明或脓性分泌物、发红、肿胀、动物撕咬或伤口裂开。

• 若出现感染、疝气、器官功能障碍等并发症，及时咨询兽医。除非方案中有描述，否则未经兽医人员确认，不允许进行修复手术。事先未获得批准而进行的修复代表二次手术和不合规事件。

• 任何异常（例如脱水、嗜睡、食欲不振）均需要咨询兽医进行支持治疗，并持续频繁的监测和护理。如果动物得到了适当及时的治疗，但症状持续恶化，则需要考虑对其进行安乐。

9 记录保存

必须保存每只或每笼动物的手术记录。建议使用手术记录卡，信息包括日期、手术名称、使用的麻醉剂和镇痛药以及给药时间、术后的监测记录。动物监测期间记录卡必须固定在笼盒上，最终由实验室按照相关法规作为永久记录保存。

10 非存活手术

• 建议提供额外的热量来稳定动物的麻醉状态，但不做严格要求。

• 所有的手术器械和植入物必须洁净，但不一定无菌。对于>4小时的长时间手术，建议使用无菌器械，以避免与细菌污染相关的炎症。

• 手术区域必须剔除毛发，但该部位不需要无菌清洗。

• 术者可以穿戴新的检查手套，而非无菌手套。

参考文献：

Principles of Rodent Surgery.  IACUC of WAYNE STATE UNIVERSITY.  12/2019