孕 鼠
1. 见栓鼠、孕鼠、见栓孕鼠的区别?
A. 见栓鼠
动物合笼后12小时观察见栓(一般操作方式:前一天下午五、六点钟合笼,第二天早上七点钟检查阴栓。大鼠因为阴栓会脱落,需要在见栓盒中1:1合笼;小鼠无需见栓盒),凡是观察到阴栓的鼠即为见栓鼠。公司售出的见栓鼠不保证100%怀孕,封闭群的大小鼠可以保证75%的怀孕率,近交系大小鼠只保证见栓。斯克贝斯生物将见栓鼠见栓当日记作“1天孕”,有的单位也有记为0.5天。
B. 孕鼠
主要针对13天(含)以上孕龄的大小鼠孕鼠。大鼠可以通过触诊感觉到胎儿,从而判断怀孕;小鼠很难触诊到胎儿,主要依靠腹围变化来界定是否怀孕,因此对于要求怀孕13天左右小鼠的订单,有时候会出现一点差错。不要求准确孕龄的,我们提供的孕鼠孕龄上下相差5天(一般出售13-17天孕鼠);孕12天之前不保证怀孕,18天(含)以上的孕鼠运输路上可能因应激而早产。
C. 见栓孕鼠
对于客户提出的要求孕龄准确的大小鼠,我们称之为见栓孕鼠或者准确怀孕日龄鼠。需要下特殊订单,单独安排动物合笼。
2. 关于孕鼠的判断和怀孕率说明
一般通过观察阴栓和动物腹围的变化来判断动物是否怀孕,动物合笼后检查到阴道栓的当天记为妊娠第1天(有的单位也记作0.5天),对于屏障内饲养的动物,见栓13天之后的大鼠可以通过触诊来判定是否怀孕;见栓13天之后的小鼠通过观察其腹部的隆起来判定是否怀孕;在此之前,只能通过观察阴道栓的有无来界定是否怀孕。
备注:
由于动物个体的差异,我们不能保证仔鼠精确的出生日期和仔鼠数量。
3. SD大鼠产仔量多少?如何早期判断孕鼠?
(1)拿永久同居的SD大鼠来说,胎间隔一般在24-28天,平均产仔10只/胎;一年四季是恒定的。
(2)一般情况下是通过查看阴栓、腹围增大有膨胀感、体重增加速度快、行动逐渐迟缓等来界定是否怀孕,多年经验的饲养员在怀孕的第10-12天通过触诊可以作出判断,一般饲养员要求在第13天以上作出正确判断即可。
4. 是否可以根据胚胎的大小和发育程度来判胚胎的天数?
从理论上讲是可以的,因为胚胎发育有一定的规律可循(下表是大小鼠不同胚胎发育阶段的特征)。
但是从实际剖检情况看,准确判定很困难,有两方面的原因:
(1)对大小鼠而言,19-21天的妊娠期只是表示出生相对集中的时间段,会有极小部分个体在妊娠期18天或者22天出生,要注意这一前一后的间隔就差了4天。假定我们认为大小鼠出生/分娩时的发育程度是相同的,而妊娠期长短的不同就可以反推即使相同孕龄的大小鼠,其发育程度也会不同。这种情况下,由于无法确切知道这只动物的最终妊娠期会是多少天,因此无法从胚胎大小(或发育程度)反推大小鼠的孕龄;
(2)对胚胎发育程度而言,有时候由于个体差异原因(例如母鼠自身原因、营养状况、胚胎数量的多少、胚胎发育快慢)对胚胎大小造成的影响要比孕龄长短对胎鼠大小的影响更为显著,从这个意义上说,根据胎鼠大小反推孕龄也是不准确的。
ICR Mice E11-18 Comparison
不同日龄小鼠胚胎发育的形态
小鼠和人类胚胎发育的形态比较 (Xue et al., 2013)。小鼠胚胎期(塞勒尔期,Theiler stages或TS期)是基于体节特征和数量而划分的。从受精到出生,大约是受精后20天(dpc),共有28个TS阶段。上图仅显示了11个阶段。人类胚胎阶段由华盛顿卡内基研究所(Carnegie Institution of Washington)描述,基于发育结构,而不是大小或发育天数。23个“卡内基阶段”(Carnegie stages, CS)仅涵盖人类胚胎发育的前60天,此后,胚胎一词被“胎儿”代替。此处显示了4-9周的5个人类胚胎。双向箭头指向器官发生类似阶段的人类和小鼠胚胎。
1) 经典的小鼠胚胎发育图谱
Karl Theiler : The House Mouse - Atlas of Embryonic Development. 1989
https://www.emouseatlas.org/emap/ema/theiler_stages/house_mouse/book.html
2) 持续更新的小鼠发育在线图谱
新南威尔士大学 - Mouse Development
https://embryology.med.unsw.edu.au/embryology/index.php/Mouse_Development
3) 受精48小时内的单细胞层次胚胎发育过程
McDole et al. In Toto Imaging and Reconstruction of PostImplantation Mouse Development at the SingleCell Level. 2018, Cell 175, 859–876.
https://doi.org/10.1016/j.cell.2018.09.031
5. 订购胎鼠大小与往常不同,可能原因有哪些?是否可以要求补货?
(1)公司可以确保见栓孕鼠的准确日龄,但是不能保证胎鼠的大小和数量。
(2)一般情况下,胚胎的大小与日龄正相关,与胚胎数量反相关,其中胚胎数量影响更大。
(3)即使日龄和胚胎数量相同,由于个体差异的存在,胚胎大小和发育程度也可能不同;同一只动物,胚胎在子宫内的着床位置不同也可导致胚胎发育程度和体形大小不同。
(4)大小鼠在胚胎发育过程中,存在胚胎滞育的现象。但是现有手段无法预测滞育时间的长短,现有资料还不能解释胚胎滞育现象出现的原因。
(5)客户不能以此为理由,要求公司补货。
乳 鼠
1. 乳鼠具体指出生几天的乳鼠?
乳鼠,顾名思义是处于哺乳期中的大小鼠,一般出生0-20天的大小鼠均叫乳鼠。一般生产单位都是在3周时离乳。
豚鼠因为是晚成型动物,哺乳期相对较短,一般1周左右离乳。
2. 出生后的乳鼠,一般几天可以区分性别?
这取决于相关人员的工作经验,技术熟练的人可在出生2-3天区分性别,不过难度较大,容易出错。目前多数生产单位是在动物3周离乳时区分动物性别并分笼饲养。
3. 收到的24小时乳鼠有一只异常或死亡,是怎么回事?
因为乳鼠自身娇嫩,对外界环境的刺激非常敏感,24小时以内的乳鼠在运输过程中可能出现意外,难以预测。
4. 购买几天的乳鼠可以养活?
对于未离乳的鼠:16天以内的乳鼠,没有母乳的情况下成活率基本是零(人工哺乳的情况除外);16-18天的乳鼠可以采食一部分软料,成活率相对高一点,但是会出现营养不良的现象;18天以上的乳鼠基本都能成活。
5. C57BL/6母鼠不带乳,导致生下的仔鼠死亡,怎么办?
母鼠生仔后,对外界的刺激非常敏感,当其感到危险时,会出现不哺乳现象,更有甚者会产生本能地保护反应而将幼仔吃掉!因此需要注意外界干扰因素的排除:例如不能频繁前去观察、不能用手接触幼仔、外界噪音不能过大、出生后的第一周不要更换垫料等。细节注意到了,问题通常就能解决了。
6. 刚离乳的大小鼠是否比成年鼠死亡率高?
是的。刚离乳的大小鼠抵抗力较成年鼠低,因此对环境温湿度等的要求更为苛刻。
参考资料
Xue et al. Global expression profiling reveals genetic programs underlying the developmental divergence between mouse and human embryogenesis. BMC Genomics 2013, 14:568
http://www.biomedcentral.com/1471-2164/14/568