实验动物镇静、止痛、麻醉以及安乐死指南

1目的：规范实验动物镇静剂、麻醉剂和止痛剂的使用，以及实验动物安乐死方法，确保人道的处理动物。

 

2范围：根据国际实验动物管理评估与认证协会（AAALAC）要求，参考Laboratory Animal Anaesthesia 和AVMA Guidelines on Euthanasia推荐的动物安乐死方法制定本使用指南。

对于给药方式说明：IP----腹腔注射 SC----皮下注射 IM----肌肉注射 IV----静脉注射  PO----口服

 

3设备与材料：CO₂气瓶；配带盖和各种动物品种大小的麻醉诱导箱；麻醉机；注射剂或吸入剂；适当规格的注射器和针；个人防护装备至少包括防护服、手套、帽子和口罩等

 

4．步骤：

4.1麻醉规程

麻醉时应认真检查所用的麻醉/止痛剂的有效使用日期，不可以使用过期的药物。

从开始麻醉到动物清醒必须对动物进行实时监护。麻醉的动物会反应迟钝、无方向感，所以麻醉时应将动物放置笼中或采取适当的措施防止动物造成损伤。动物完全麻醉（完全失去意识）方可开始手术。

麻醉期间应注意对动物采取适当的保温措施，如电热毯或红外线加热灯，防止动物体温降低。

 

4.2对麻醉程度的检测

如果动物有翻身反应或对疼痛和刺激发生反应，如表现蠕动、移动、收回肢体，则手术必须延迟进行。

深度疼痛测试，用手指挤压动物的后肢脚趾，如果动物有反应如缩回后肢，则动物意识未完全消失；如果动物对测试无反应，则为无意识或意识消失，麻醉达到手术要，可以开始手术。

外科手术开始时，动物应充分松弛、对疼痛刺激无反应、呼吸和心率正常。

 

4.3设施

在动物房或手术室实施麻醉。但麻醉时应尽量不要在其它动物听到、看见和闻到的区域进行。

 

4.4局部麻醉

局麻是在小的非创伤性手术时，减轻动物痛苦而采取的措施。局麻的选择将取决于手术所需时间的长短、场所和动物品种。常用的局麻药有盐酸利多卡因和盐酸普鲁卡因。

 

4.5剂量计算

根据动物的体重，计算麻醉药合适的给药剂量。

例如，用氯胺酮+安定麻醉300g的大鼠

氯胺酮的剂量是75mg/kg，安定是5mg/kg

因此，0.300kg×75mg/kg=22.5mg氯胺酮

0.300kg×5mg/kg=1.5mg安定

 

4.6根据动物品种选择麻醉药物、剂量和给药途径

吸入麻醉剂（如异丙烷）所有品种的动物均适用。钢瓶中压缩CO₂气体与氧气（50:50）混合至100%的CO₂可以用于啮齿类动物短期吸入麻醉剂。

 

4.7.1 CO₂麻醉

CO₂诱导短暂的失去意识并适用于某些实验过程，如眼眶后静脉丛采血和一些注射。每次只麻醉一只动物。

使用一个与氧气未混合的CO₂相连的容器。打开气瓶的主要阀门，通过微调从而调整气体压力。把动物放进气体流动的容器并关上容器盖子。离开动物1-3/2分钟直到动物呼吸缓慢和无意识，从容器中取出动物开始实验。动物将维持20-30秒无意识状态。如果需要再麻醉20秒，追加一次麻醉剂量，不可以连续超过2次追加CO₂麻醉。动物在容器中不可以放置超过5/2分钟。

动物将完全恢复，动物一恢复意识就放回原笼中。

在动物放进容器前，通过往眼里滴一滴盐酸丙对卡因更有宜于眼眶后静脉丛采血。局麻可以使动物减少对操作的敏感性并延长动物失去意识的时间，动物大约10秒钟就失去意识。先于采血前眼睛用薄纸擦拭以除去残余的盐酸丙对卡因。

 

4.7.2 常用的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.1小鼠的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.1.1小鼠镇静剂和诱导麻醉药物的选择

术前诱导麻醉药物	剂量	给药方式	效果
阿托品	0.04 mg/kg	SC or IP	抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射
安定	5 mg/kg	IP	轻微镇静作用；不能止痛
氟胺酮	0.1-0.3 ml/kg	IP	轻度镇静，中度止痛；
氯胺酮	100-200 mg/kg	IM	深度镇静，轻微止痛；缺乏肌肉松弛作用

4.7.2.1.2小鼠麻醉药物的选择

注射用麻醉剂	剂量	给药方式	麻醉深度(轻度/外科麻醉)	持续时间(min)	恢复时间(min)
氯胺酮﹠安定	100mg/kg﹠5mg/kg	IP	保定/麻醉	20-30	60-120
丙泊酚	26mg/kg	IV	外科麻醉	5-10	10-15
氟胺铜﹠安定	0.4ml/kg&5mg/kg	IP or IP	外科麻醉	20-40	120-240
丙泊酚	26mg/kg(然后2-2.5mg/kg/min)	IV	外科麻醉	1-12hours	10-15
异氟烷	0.41ml/minat 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)	吸入	外科麻醉	--	--
三溴乙醇（阿弗丁)	125-240 mg/kg(使用浓度0.25%)	IP	外科麻醉	15-45	60-120

注： 100%阿佛丁（三溴乙醇+叔戊醇=1:1配成）；使用时用生理盐水进行稀释使用。

异氟烷使用需要面罩。

4.7.2.1.3小鼠止痛药物的选择

止痛剂	剂量	给药方式	效果	效果持续时间
阿司匹林	120 mg/kg	PO	轻微止痛	-
丁丙诺啡	0.05-0.1mg/kg	SC	中等止痛	8-12 Hours
卡洛芬	5 mg/kg	SC	中等止痛	24 Hours
美洛昔康	5 mg/kg	SC	中等止痛	24 Hours

4.7.2.1.4小鼠安乐死的药物和方法选择

药物或方法	剂量	试用动物	备注
戊巴比妥钠	100-200 mg/kg	所有小鼠	可接受方法
CO2	----	成年小鼠	可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间
颈椎脱臼	----	所有小鼠	条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术

4.7.2.2大鼠的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.2.1大鼠镇静剂和诱导麻醉药物的选择

术前诱导麻醉药物	剂量	给药方式	效果
阿托品	0.05 mg/kg	SC or IP	抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射
氟胺酮	0.2-0.5 ml/kg	IM	轻度/中度镇静，中度止痛；
安定	2.5-5 mg/kg	IP or IM	轻微镇静作用；不能止痛
氯胺酮	50-100 mg/kg	IP or IM	深度镇静，轻微止痛；缺乏肌肉松弛作用

4.7.2.2.2大鼠麻醉药物的选择

注射用麻醉剂	剂量	给药方式	麻醉深度（轻度/外科麻醉）	持续时间 min	恢复时间 min
氯胺酮﹠安定	75mg/kg﹠ 5mg/kg	IP	轻度麻醉	20-30	120
丙泊酚	10 mg/kg	IV	外科麻醉	5	10
氟胺铜﹠ 安定	0.6ml/kg﹠ 2.5mg/kg	IP or IP	外科麻醉	20-40	120-240
丙泊酚	10-12mg/kg（然后0.5-1.0mg/kg/min）	IV	外科麻醉	1-12 hours	10-15
异氟烷	0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)	吸入	外科麻醉	--	--
三溴乙醇（阿弗丁）	300 mg/kg	IP	外科麻醉	10-20	45-90

注： 100%阿佛丁（三溴乙醇+叔戊醇=1:1配成）；使用时用生理盐水进行稀释使用。

异氟烷使用需要面罩。

4.7.2.2.3大鼠止痛药物的选择

止痛剂	剂量	给药方式	效果	效果持续时间
阿司匹林	100 mg/kg	PO	中等止痛	-
卡洛芬	5 mg/kg	SC	中等止痛	24 Hours
美洛昔康	5 mg/kg	SC	中等止痛	24 Hours
丁丙诺啡	0.01-0.05mg/kg	SC or IV	中等止痛	8-12 Hours
丁丙诺啡	0.1-0.25mg/kg	PO	中等止痛	8-12 Hours

4.7.2.2.4大鼠安乐死的药物和方法选择

药物或方法	剂量	试用动物	备注
戊巴比妥钠	100-200 mg/kg	所有大鼠	可接受方法
CO2	----	成年大鼠	可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间
颈椎脱臼	----	体重＜200g	条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术颈椎脱臼前需要进行麻醉处理

4.7.2.3豚鼠的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.3.1豚鼠镇静剂和诱导麻醉药物的选择

术前诱导麻醉药物	剂量	给药方式	效果
阿托品	0.05 mg/kg	SC	抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射
安定	5 mg/kg	IP or IM	深度镇静作用
氟胺酮	1.0 ml/kg	IP or IM	中度镇静，中度止痛；
氯胺酮	100 mg/kg	IM	深度镇静，轻微止痛；缺乏肌肉松弛作用

4.7.2.3.2豚鼠麻醉药物的选择

注射用麻醉剂	剂量	给药方式	麻醉深度（轻度/外科麻醉）	持续时间 min	恢复时间 min
氟胺铜﹠ 安定	1.0ml/kg﹠ 2.5mg/kg	IP or IM﹠IP	外科麻醉	45-60	120-180
氟胺铜﹠ 安定	1.0ml/kg/h﹠ 2mg/kg（每4小时）	IP ﹠IP	外科麻醉	1-12 hours	120-180
氯胺酮﹠ 安定	100 mg/kg﹠ 5mg/kg	IM	保定/麻醉	30-45	90-120
异氟烷	0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)	吸入	外科麻醉	--	--

注： 异氟烷使用需要面罩。

4.7.2.3.3豚鼠止痛药物的选择

止痛剂	剂量	给药方式	效果	效果持续时间
阿司匹林	87 mg/kg	PO	轻微止痛	-
卡洛芬	4 mg/kg	SC	中等止痛	24 Hours
丁丙诺啡	0.01-0.05 mg/kg	SC or IP	中等止痛	大约8-12 Hours

4.7.2.3.4豚鼠安乐死的药物和方法选择

药物或方法	剂量	试用动物	备注
戊巴比妥钠	100-200 mg/kg	所有豚鼠	可接受方法
CO2	----	成年豚鼠	可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间

4.7.2.4兔子的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.4.1兔子镇静剂和诱导麻醉药物的选择

术前诱导麻醉药物	剂量	给药方式	效果
阿托品	0.05 mg/kg	IM	抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射
安定	0.5-2 mg/kg	IP or IM or IV	由轻到重度镇静；不能止痛
氟胺酮	0.2-0.5 ml/kg	IM	轻到中度镇静，轻到深度止痛；
氯胺酮	25-50 mg/kg	IM	中度缓解镇静，中度止痛；缺乏肌肉松弛作用

4.7.2.4.2兔子麻醉药物的选择

注射用麻醉剂	剂量	给药方式	麻醉深度（轻度/外科麻醉）	持续时间 min	恢复时间 min
美索比妥	10-15mg/kg（使用浓度1%）	IV	外科麻醉	4-5	5-10
丙泊酚	10 mg/kg	IV	轻度麻醉	5-10	10-15
氟胺铜﹠ 安定	0.3ml/kg﹠ 1-2 mg/kg	IM ﹠ IV	外科麻醉	20-40	60-120
氟胺铜﹠ 安定	0.1-0.3ml/kg/h﹠ 1mg/kg（每4 小时）	IV ﹠ IV	外科麻醉	1-12 hours	60-120
异氟烷	0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)	吸入	外科麻醉	--	--
氯胺酮﹠ 安定	25 mg/kg﹠ 5mg/kg	IM ﹠IM	外科麻醉	20-30	60-90

注： 异氟烷使用需要“Bain's回路”或者“Ayre's三通管”。

4.7.2.4.3兔子止痛药物的选择

止痛剂	剂量	给药方式	效果	效果持续时间
阿司匹林	100 mg/kg	PO	轻微止痛	不清晰
卡洛芬	4 mg/kg	SC	中等止痛	24 Hours
丁丙诺啡	0.05-0.1mg/kg	SC or IP	中等止痛	8-12 Hours

4.7.2.4.4 兔子安乐死的药物和方法选择

药物或方法	剂量	试用动物	备注
戊巴比妥钠	100-200 mg/kg	所有兔子	可接受方法
CO2	----	成年兔子	可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间
颈椎脱臼	----	体重＜1 kg	条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术(颈椎脱臼前需要进行麻醉处理)

4.7.2.5犬的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.5.1犬镇静剂和诱导麻醉药物的选择

术前诱导麻醉药物	剂量	给药方式	效果
阿托品	0.05 mg/kg	SC or IM	抗胆碱能作用；
美托咪啶	10-100ug/kg	SC or IM or IV	轻到深度镇静；轻到中度止痛
乙酰丙嗪	0.1-0.25 mg/kg	IM	轻到中度镇静作用
氟胺酮	0.1-0.2 ml/kg	IM	中度到深度镇静，中度止痛；

4.7.2.5.2犬麻醉药物的选择

注射用麻醉剂	剂量	给药方式	麻醉深度（轻度/外科麻醉）	持续时间 min	恢复时间min
丙泊酚	5-7.5 mg/kg	IV	外科麻醉	5-10	15-30
丙泊酚	5-7.5mg/kg（然后0.2-0.4mg/kg/min）	IV	外科麻醉	20-30	15-30
丙泊酚	5-7.5mg/kg（然后0.2-0.4mg/kg/min）	IV	外科麻醉	1-12 hours	10-15
异氟烷	0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)	吸入	外科麻醉	--	--
氯胺酮﹠美托咪啶	2.5-7.5 mg/kg﹠ 40ug/kg	IM or IM	轻到中度麻醉	30-45	60-120

注： 异氟烷使用需要“Bain's或者 MaGill回路”。

4.7.2.5.3犬止痛药物的选择

止痛剂	剂量	给药方式	效果	效果持续时间
卡洛芬	4 mg/kg	SC	中等止痛	24 Hours
美洛昔康	0.2 mg/kg	SC	中等止痛	24 Hours
丁丙诺啡	0.005-0.02 mg/kg	SC or IP	中等止痛	8-12 Hours

4.7.2.5.4犬安乐死的药物和方法选择

药物或方法	剂量	试用动物	备注
戊巴比妥钠	100-200 mg/kg	所有犬	可接受方法
CO2	----	成年犬	可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间
氯化钾联合其他麻醉药	----	所有犬	条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术（心内注射氯化钾前先进行麻醉处理）

4.7.2.6小型猪的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.6.1小型猪镇静剂和诱导麻醉药物的选择

术前诱导麻醉药物	剂量	给药方式	效果
阿托品	0.05 mg/kg	SC or IM	抗胆碱能作用；
安定	1-2 mg/kg	IM	轻到中度镇静作用；
氯胺酮	10-15 mg/kg	IM	镇静；保定

4.7.2.6.2小型猪麻醉药物的选择

注射用 麻醉剂	剂量	给药方式	麻醉深度（轻度/外科麻醉）	持续时间 min	恢复时间 min
氯胺酮	10-15 mg/kg	IM	镇静；保定	20-30	60-120
丙泊酚	2.5-3.5 mg/kg	IV	外科麻醉	5-10	15-30
丙泊酚	2.5-3.5mg/kg（然后0.1-0.2mg/kg/min）	IV	外科麻醉	20-30	15-30
丙泊酚	2.5-3.5mg/kg（然后0.1-0.2mg/kg/min）	IV	外科麻醉	1-12 hours	10-15
异氟烷	0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)	吸入	外科麻醉	--	--
氯胺酮﹠ 安定	10-15 mg/kg﹠ 0.5-2mg/kg	IM ﹠IM	保定/轻度麻醉	20-30	60-90

注： 异氟烷使用需要“Bain's或者 MaGill回路”或者“循环系统”。

4.7.2.6.3小型猪止痛药物的选择

止痛剂	剂量	给药方式	效果	效果持续时间
卡洛芬	2-4 mg/kg	SC	中等止痛	24 Hours
丁丙诺啡	0.01-0.05mg/kg	SC or IP	中等止痛	8-12 Hours

4.7.2.6.4小型猪安乐死的药物和方法选择

药物或方法	剂量	试用动物	备注
戊巴比妥钠	100-200 mg/kg	所有小型猪	可接受方法
CO2	----	成年小型猪	可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间
氯化钾联合其他麻醉药	----	所有小型猪	条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术（心内注射氯化钾前先进行麻醉处理）
打击头部	----	幼龄猪周龄	条件可接受；要求技术，充分保定，和适当的力量

4.7.2.7非人灵长类的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法

术前诱导麻醉药物	剂量	给药方式	效果
阿托品	0.05 mg/kg	SC or IM	抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射
安定	1 mg/kg	IM	轻到中度镇静
氯胺酮	5-25 mg/kg	IM	中度镇静；保定；轻微止痛；

4.7.2.7.1非人灵长类镇静剂和诱导麻醉药物的选择

注射用麻醉剂	剂量	给药方式	麻醉深度（轻度/外科麻醉）	持续时间 min	恢复时间 min
丙泊酚	7-8 mg/kg	IV	外科麻醉	5-10	10-15
氯胺酮﹠ 美托咪啶	5 mg/kg﹠ 0.05mg/kg	IM ﹠IM	外科麻醉	30-40	60-120
丙泊酚	7-8 mg/kg （然后0.3-0.6mg/kg/min）	IV	外科麻醉	1-12 hours	10-15
异氟烷	0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)	吸入	外科麻醉	--	--
氯胺酮﹠ 安定	15 mg/kg﹠ 1mg/kg	IM ﹠IM	外科麻醉	30-40	60-90

4.7.2.7.2非人灵长类麻醉药物的选择

注射用麻醉剂	剂量	给药方式	麻醉深度（轻度/外科麻醉）	持续时间 min	恢复时间 min
丙泊酚	7-8 mg/kg	IV	外科麻醉	5-10	10-15
氯胺酮﹠ 美托咪啶	5 mg/kg﹠ 0.05mg/kg	IM ﹠IM	外科麻醉	30-40	60-120
丙泊酚	7-8 mg/kg （然后0.3-0.6mg/kg/min）	IV	外科麻醉	1-12 hours	10-15
异氟烷	0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)	吸入	外科麻醉	--	--
氯胺酮﹠ 安定	15 mg/kg﹠ 1mg/kg	IM ﹠IM	外科麻醉	30-40	60-90

注： 异氟烷使用需要“Bain's回路或者 Ayre's三通管（体重<10 kg）”或者“MaGill回路（体重>10 kg）”。

4.7.2.7.3非人灵长类止痛药物的选择

止痛剂	剂量	给药方式	效果	效果持续时间
氟胺铜	0.3ml /kg	IM	良好止痛	-
卡洛芬	3-4 mg/kg	SC	中等止痛	24 Hours
美洛昔康	0.1-0.2 mg/kg	SC	中等止痛	24 Hours
丁丙诺啡	0.005-0.01 mg/kg	IM or IV	中等止痛	8-12 Hours
吗啡	1-2 mg/kg	SC or IM	中等止痛	4 Hours

4.7.2.7.4非人灵长类安乐死的药物和方法选择

药物或方法	剂量	试用动物	备注
戊巴比妥钠	100-200 mg/kg	所有非人灵长类	可接受方法
吸入麻醉CO2	----	成年非人灵长类	可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间

4.7.2.8鸟的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.8.1鸟镇静剂和诱导麻醉药物的选择

术前诱导麻醉药物	剂量	给药方式	效果
氯胺酮（>1 kg）	15-20 mg/kg	IM	轻微止痛；保定
氯胺酮（<1 kg）	30-40 mg/kg	IM	轻微止痛；保定

4.7.2.8.2鸟麻醉药物的选择

注射用麻醉剂	剂量	给药方式	麻醉深度（轻度/外科麻醉）	持续时间 min	恢复时间 min
氯胺酮﹠ 安定	20-40 mg/kg﹠ 1-1.5mg/kg	IM ﹠IM	中等外科麻醉	20-30	30-90

4.7.2.8.3鸟止痛药物的选择

止痛剂	剂量	给药方式	效果	效果持续时间
丁丙诺啡	0.01-0.05mg/kg	IM	中等止痛	8-12 Hours

4.7.2.8.4鸟安乐死的药物和方法选择

药物或方法	剂量	试用动物	备注
戊巴比妥钠	100-200 mg/kg	所有鸟	可接受方法
CO2	----	成年鸟	可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间
颈椎脱臼	----	所有鸟	条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术（脱臼前进行麻醉处理）
胸部压迫	----	小到中型鸟类	条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术

4.7.2.9鱼的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.9.1鱼镇镇静、麻醉、止痛和诱导麻醉药物的选择

注射用麻醉剂	剂量	给药方式	麻醉深度（轻度/外科麻醉）	持续时间 min	恢复时间 min
MS222	25-300 mg/l	沉浸	外科麻醉
盐酸苯佐卡因	25-100 mg/l	沉浸	外科麻醉	2 分钟诱导	撤消后5分钟恢复

注：1.苯佐卡因配置：首先200 mg苯佐卡因+5 ml 丙酮，进行溶解，再加入8 L 水配置成25ppm(25mg/l)的苯佐卡因。

2.小到中型鱼（金鱼和鲑鱼），MS222 浓度为100 mg/l。

4.7.2.9.2鱼安乐死的药物和方法选择

药物或方法	剂量	试用动物	备注
MS222	≧300 mg/l	所有鱼类	可接受方法
盐酸苯佐卡因	≧100 mg/l	成年鱼类	可接受方法
脑脊髓刺毁法	----	所有鱼类	条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术

4.8保存记录

需要所有麻醉程序的手写记录文件。记录应该包括但不仅局限于以下几点：

IACUC动物使用和管理方案编号

麻醉日期、时间和负责人签字

品系和个体或动物组别标记

使用的麻醉剂、止痛剂或镇静剂名称、剂量、给药途径和时间

如果需要在整个过程中监测生理参数（如心率、呼吸次数/节律、体温、粘膜色泽和足部的松弛度等）

 

4.9术后恢复

动物可与正处于恢复期的同一品系动物放在一个笼具中，也可单独放在一个饲养笼内，但不要与未麻醉的动物放在一起，防止恢复期动物受伤。动物恢复期必须保温。当动物恢复正常活动时，可以与其它动物放回同一笼或一个动物房间。随后几天必须定时对动物进行观察保证不出现并发症。