实验动物的标记方法

日期:05-06  2068  属于:新闻资讯

实验动物常需要标记以示区别。编号的方法很多,根据动物的种类数量和观察时间长短等因素来选择合适的标记方法。

(一)挂牌法:将号码烙压在圆形或方形金属牌上(最好用铝或不锈钢的,它可长期使用不生锈),或将号码按实验分组编号烙在栓动物颈部的皮带上,将此颈圈固定在动物颈部。该法适用于狗等大型动物。

(二)打号法:用刺数钳(又称耳号钳)将号码打在动物耳朵上。打号前用蘸有酒精的棉球擦净耳朵,用耳号钳刺上号码,然后在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。该法适用于耳朵比较大的兔、狗等动物。

(三)针刺法:用七号或八号针头蘸取少量碳素墨水,在耳部、前后肢以及尾部等处刺入皮下,在受刺部位留有一黑色标记。该法适用于大小鼠、豚鼠等。在实验动物数量少的情况下,也可用于兔、狗等动物。

(四)化学药品涂染动物被毛法:经常应用的涂染化学药品有

涂染红色:0.5%中性红或品红溶液。

涂染黄色:3-5%苦味酸溶液。

涂染黑色:煤焦油的酒精溶液。

根据实验分组编号的需要,可用一种化学药品涂染实验动物背部被毛就可以。如果实验动物数量较多,则可以选择两种染料。该方法对于实验周期短的实验动物较合适,时间长了染料易退掉;对于哺乳期的子畜也不适合,因母畜容易咬死子畜或把染料舔掉。

(五)剪毛法:该法适用于大、中型动物,如狗、兔等。方法是用剪毛刀在动物一侧或背部剪出号码,此法编号清楚可靠,但只适于短期观察。

(六)打孔或剪缺口法:可用打孔机在兔耳一定位置打一小孔来表示一定的号码。如用剪子剪缺口,应在剪后用滑石粉捻一下,以免愈合后看不出来。该法可以编至1~ 9999号,此种方法常在饲养大量动物时作为终身号采用。

 

常用的大、小鼠染色方法

 

常用染色剂如下:
(1)3% ~ 5%苦味酸溶液(即2,4,6-三硝基苯酚),因与动物的被毛中的蛋白发生反应,可染成较为牢固的亮黄色。可用水,也可用一定浓度的乙醇来配制。
(2)0.5% 中性红或品红溶液,可染成红色。
(3)2%硝酸银溶液,涂染后在可见光下暴露十分钟左右可染成咖啡色。
(4)煤焦油乙醇溶液,可染成黑色。
染色法适用于被毛白色的实验动物,如:大鼠、小鼠等。

涂染方法:
1单色涂染法

单色涂染法是用单一颜色的染色剂涂染实验动物不同部位的方法。常用的就是苦味酸,或者品红。也有用苦味酸标雄性,品红标雌性的。均可。
根据个人习惯及不同实验室的传统,可有多种不同的编号方法。当前的编号方法可谓林林总总,新的“发明创造”很多。甚至一个实验室不同的人做实验,编号方法完全不一样。但,在此,我想提醒大家一下:同一个实验室,标号方法最好统一。众所周知,药理实验一般都是要靠两个及以上的多人合作才能完成,非常需要协作精神。而如果参与实验的人对其中一个的编号方法不熟悉,就可能导致误拿,或者降低工作效率。因此,统一编号是非常重要的。

在此,我介绍一种本人长期使用的编号方法。这也是《医学科研导论》一书中推荐使用的方法。优点是:可编1~999之间的号码,且标志明显,易学易用,对于统一编号很有参考价值。适合于小鼠、大鼠、豚鼠的编号。

如图,以小鼠为例。以俯视图来看,右侧为个位,耳朵下表示“1”,右前肢表示表示“2”,右腹侧表示“3”,右后肢表示“6”;同样,左侧表示十位,其余与右侧一样;中间表示百位,两耳之间表示“1”,两前肢中间表示“2”,背正中表示“3”,尾椎处表示“6”。其余数字由上述数字进行组合,如:4=1+3,5=2+3,7=1+6,8=2+6,9=3+6。但“3”不能由“1+2”来表示,因为本身就有。因此,不可能出现耳朵和前肢同时有标记的现象,也不可能出现在同一侧有三处标记的现象。

如:48,则在左侧耳下及腹部各标一点,在右侧前、后肢各标一点。

我想,大家应不难根据上述规则读出下图最右侧图中标记的小鼠的编号。

此法的优点就是清晰易辩,可编号码数多;缺点就是因涂染点较多,故涂染时要牢固,如不太清晰,隔一定时间要加染。

有人喜欢把每一笼中的动物分别标为1,2,3,4等等。个人觉得这样不可取。一则,这样的标号肯定是没有进行随机分组的。二则,做实验时一不小心就全乱套了。 

2双色涂染法

双色涂染法是采用两种颜色同时进行染色标记的方法。例如用苦味酸(黄色)染色标记作为个位数,用品红(红色)染色标记作为十位数。此法略嫌烦杂。一般不太用。

3直接标号法

直接标号法是使用染色剂直接在实验动物被毛、肢体上编写号码的方法。偶用。

染色法虽然简单方便,不会给实验动物造成损伤和痛苦,但是长时间实验会使涂染剂自行褪色,或由于实验动物互相嬉闹、舔毛、摩擦、换毛、粪尿和饮水浸湿被毛等原因,易造成染色标记模糊不清。因而用于慢性实验时,要注意不断地补充和加深染色。一般而言,半个月左右加深一次效果不错。当然,也可以视情况随时补充。

另外,常用染色剂的毒性对实验动物的影响也是需要注意的一个问题。 

信息来源:丁香通;医脉通

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